Способ просветления грубых ботанических объектов для микроскопического изучения

Номер инновационного патента: 30192

Опубликовано: 17.08.2015

Авторы: Жумадилов Булат Зулхарнаевич, Тарасовская Наталия Евгеньевна

Скачать PDF файл.

Формула / Реферат

Изобретение относится к области биологии и методики преподавания естественнонаучных дисциплин, в частности, к способам просветления и изготовления микропрепаратов биологических объектов для научных и учебно-методических целей.
Предлагаемый способ просветления грубых ботанических и микологических объектов заключается в том, что растительные объекты или грибы помещаются в антифриз при объемном соотношении материала и просветляющей жидкости 1:1 (для относительно сухих) или 1:2 (для более влажных объектов) на срок от 2-3 часов до 1 -3 суток и более в зависимости от ригидности и толщины объекта.
Для приготовления микропреиарата тонкий срез или небольшой фрагмент объекта помещается на предметное стекло под покровное в каплю антифриза, и препарат готов для микроскопического изучения. Изготовленные таким способом временные препараты хранятся и сохраняют свою учебно-методическую ценность несколько месяцев, а при небольшом испарении жидкости в препарат можно добавить еще 1-2 капли антифриза.
Преимущества предлагаемого способа работы с грубыми ботаническими объектами состоят в использовании доступной, выпускаемой промышленностью технической жидкости, которая не содержит летучих компонентов, одновременно консервирует, просветляет лабораторный материал без осмотической деформации, снижает его ригидность и используется в качестве заливочной среды в микропрепарате.

Текст

Смотреть все

(51) 01 1/00 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ грибы помещаются в антифриз при объемном соотношении материала и просветляющей жидкости 11 (для относительно сухих) или 12 (для более влажных объектов) на срок от 2-3 часов до 1-3 суток и более в зависимости от ригидности и толщины объекта. Для приготовления микропрепарата тонкий срез или небольшой фрагмент объекта помещается на предметное стекло под покровное в каплю антифриза, и препарат готов для микроскопического изучения. Изготовленные таким способом временные препараты хранятся и сохраняют свою учебно-методическую ценность несколько месяцев,а при небольшом испарении жидкости в препарат можно добавить еще 1-2 капли антифриза. Преимущества предлагаемого способа работы с грубыми ботаническими объектами состоят в использовании доступной,выпускаемой промышленностью технической жидкости, которая не содержит летучих компонентов, одновременно консервирует, просветляет лабораторный материал без осмотической деформации, снижает его ригидность и используется в качестве заливочной среды в микропрепарате.(72) Тарасовская Наталия Евгеньевна Жумадилов Булат Зулхарнаевич(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Павлодарский государственный педагогический институт Министерства образования и науки Республики Казахстан(56) Хржановский В.Г., Пономаренко С.Ф. Практикум по курсу общей ботаники, 1979, с.114,119, 200, 214(54) СПОСОБ ПРОСВЕТЛЕНИЯ ГРУБЫХ БОТАНИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ ДЛЯ МИКРОСКОПИЧЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ(57) Изобретение относится к области биологии и методики преподавания естественнонаучных дисциплин, в частности, к способам просветления и изготовления микропрепаратов биологических объектов для научных и учебно-методических целей. Предлагаемый способ просветления грубых ботанических и микологических объектов заключается в том, что растительные объекты или Изобретение относится к области биологии и методики преподавания естественнонаучных дисциплин, в частности, к способам просветления и изготовления микропрепаратов биологических объектов для научных и учебно-методических целей. Обычно при изготовлении микропрепаратов ботанических объектов на лабораторных занятиях практикуют приготовление вручную тонких срезов,и рассматривают их в капле воды. Для грубых ботанических объектов - плодовых тел грибов,слоевищ лишайников - рекомендуется изготовление тонких срезов или изучение постоянных препаратов заводского изготовления (Хржановский В.Г.,Пономаренко С.Ф. Практикум по курсу общей ботаники. Учеб. Пособие. - М Высшая школа, 1979. с.422,ил. с.200,214),для изучения микроскопического строения корнеплодов рекомендованы постоянные препараты (там же,с.87). Для исследования внутреннего строения одревесневших стеблей растений рекомендовано просветление тонких срезов в капле глицерина (там же, с.114, 119). Однако рекомендованные способы просветления и подготовки грубого растительного материала к микроскопическому изучению приемлемы не для всех грубых ботанических и микологических объектов. В частности, некоторые очень грубые объекты - слоевища лишайников, плодовые тела трутовиков и афиллофоровых грибов, грубые древесные стебли, корневища и корнеплоды длительно и с трудом просветляются глицерином даже в тонких срезах (что отнимает у учащихся и студентов много времени на лабораторных занятиях). А многие нативные объекты при известных способах самостоятельного изготовления временных микропрепаратов на предметном стекле остаются почти неприемлемыми для этого ввиду грубости и ригидности тканей. Использование на лабораторных занятиях в основном или исключительно постоянных препаратов заводского изготовления не обеспечит необходимой взаимосвязи теории с практикой для студентов профильных вузов (в том числе и в аспекте изучения региональных ботанических объектов). Задачей изобретения является разработка способа и средства для просветления грубых ботанических и микологических объектов и подготовки их к микроскопическому исследованию с достижением оптической прозрачности,снижением или полным устранением ригидности,возможностью консервирования и длительного хранения в просветляющей жидкости. Для решения поставленной задачи предлагается помещение грубого растительного или микологического материала в антифриз,содержащий этиленгликоль (в массовой доле 30-62), воду, антикоррозионные и другие технологические добавки (СТО 63252493-001-2011),многие из которых обладают консервирующим и антимикробным действием, при соотношении объема ботанического материала и жидкости от 11 2(для сухого материала) до 12 (для относительно влажного). Этиленгликоль основной компонент антифриза - меняет показатель преломления лучей и делает объекты оптически прозрачными так же, как и глицерин. Он быстро проникает в ткани любых объектов, даже самых грубых и ригидных, и смягчает твердые структуры без их деформации,позволяя быстро приготовить временный препарат ботанического объекта на предметном стекле. Этиленгликоль, в отличие от глицерина, не вызывает осмотической деформации нежных структур, находящихся среди грубых (например,водорослевый компонент лишайника среди грибных гиф). Консервирующий эффект этиленгликоля и технологических добавок в антифризе позволяет сохранять просветляемый материал в течение нескольких месяцев и лет (единственным недостатком может быть частичная потеря пигментации зелеными частями растений) и использовать на лабораторных занятиях по мере необходимости. Технический результат,обеспечиваемый изобретением, заключается в следующем. 1) Использование готовой технической жидкости, которая выпускается промышленностью и поступает в продажу без ограничений. 2) Экономическая и организационная целесообразность использования антифриза одновременно в качестве консерванта для лабораторного материала и заливочной среды для просветления объектов в микропрепарате к тому же эта жидкость обходится намного дешевле глицерина и других традиционных просветляющих реагентов. 3) Возможность длительного хранения консервированного ботанического материала и организации лабораторных занятий с региональными объектами в любое время года. 4) Хорошее просветление любых объектов без осмотической деформации тонких структур. 5) Устранение ригидности и возможность любых действий с объектом (изготовление тотальных препаратов на предметном стекле, срезов). 6) Отсутствие запаха от объекта и консервирующей среды. 7) Используемая для хранения и просветления жидкость нелетучая, не поступает в организм работающих аспирационным путем меры безопасности сводятся к обычным правилам гигиены (мытье рук после работы с материалом). Предлагаемый способ просветления грубых ботанических и микологических объектов заключается в следующем. Растительные объекты или грибы помещаются в антифриз при объемном соотношении материала и просветляющей жидкости 11 (для относительно сухих) или 12 (для более влажных объектов) на срок от 2-3 часов до 1-3 суток и более в зависимости от ригидности и толщины объекта. Затем небольшой фрагмент объекта(сравнительно тонкий продольный или поперечный срез стебля, плодового тела гриба, кусочек слоевища лишайника) помещается на предметное стекло под покровное в каплю антифриза, и препарат готов для микроскопического изучения. Ввиду того, что этиленгликоль является гигроскопичной невысыхающей жидкостью, а антифризы содержат его до 60 и более,приготовленные таким способом временные препараты хранятся и сохраняют свою учебнометодическую ценность длительное время(несколько месяцев). В случае небольшого испарения жидкости за счет содержания воды, воды в препарат можно добавить еще 1-2 капли антифриза. Результаты испытаний способа просветления показали позитивные результаты в отношении широкого круга грубых объектов. Пример 1. Слоевища лишайников пармелии блуждающей и кладонии помещены в антифриз в объемном соотношении материала и жидкости 11 при периодическом контроле просветления, под стереоскопическим микроскопом. Через 2-3 часа в отдельных молодых слоевищах стали видны соредии, изидии, клетки водорослей. Через 2-3 суток все слоевища достигли оптической прозрачности,достаточной для просмотра под любым увеличением микроскопа. Пример 2. Иглы сосны обыкновенной,помещенные в антифриз при объемном соотношении 11, уже через 1-2 часа дали хорошее просветление поверхностных слоев клеток, через 3 часа хвоинки просветлились полностью. Хвоя,извлеченная из антифриза через несколько дней,была хорошо просветлившейся, без признаков деструкции тканей. Пример 3. Срезы плодовых тел свежих, сухих и маринованных грибов толщиной 0,5-1 см поместили в антифриз в объемном соотношении 11. Через 1, 2 и 3 часа были приготовлены тонкие срезы для изучения под микроскопом во всех случаях гифы мицелия (в том числе гимениального слоя шляпки) просматривались уже достаточно хорошо. Через несколько дней изменения объектов в антифризе не произошло на срезах хорошо просматривался мицелий, признаков деструкции и деформации материала на микро- или макроуровне не было. Пример 4. Побег рдеста блестящего был помещен в продажный антифриз в 2006 г. В конце 2013 года фрагменты растения были использованы на лабораторных занятиях по ботанике. При небольшом увеличении стереоскопического микроскопа МБС-9 на целом листе хорошо просматривались проводящие пучки, эпителиальные ткани. На срезах были хорошо видны клетки паренхимы. При длительном хранении естественный цвет растения был потерян, однако отмечена полная сохранность, отсутствие признаков лизиса и микробной порчи, полная прозрачность всех тканей. Пример 5. Корневища аира и качима метельчатого были выкопаны из земли, очищены от ила и почвы и помещены в банку с антифризом. Через 3-4 дня наиболее тонкие корневища приобрели стеклообразный вид и оптическую прозрачность у толстых корневищ прозрачность была достигнута несколько позже. Консистенция корневищ - мягкая, но упругая, что позволило без труда изготавливать тонкие срезы для микроскопического изучения внутреннего строения подземных побегов. Фиксированные объекты хранились в антифризе в течение 3,5 месяцев (срок наблюдения),они оставались прозрачными,пригодными для изготовления тонких срезов. Пример 6. Корнеплоды моркови были разрезаны на фрагменты толщиной 1-1,5 см и помещены в антифриз при объемном соотношении материала и консерванта 11-2. Прозрачность срезов достигнута через 5-7 дней. Консистенция - несколько мягче обычной, упругая, удобная для изготовления срезов. Во временных препаратах на тонких продольных и поперечных срезах под микроскопом хорошо видны все ткани корнеплода. Пример 7. Срезы клубней картофеля толщиной 1-1,5 см поместили в антифриз в объемном соотношении материала и фиксатора 11-1,5. Через 5-7 дней срезы стали прозрачными и приобрели мягкую и упругую консистенцию, удобную для изготовления срезов. На временных препаратах срезов, помещенных в каплю антифриза, хорошо видны все структуры и зерна запасного крахмала. Хранение в течение 3 месяцев (срок наблюдения) не вызвало негативных изменений в объекте срезу клубней оставались прозрачными и периодически использовались на лабораторных занятиях и практикумах. Таким образом,результаты испытаний показывают, что растительные объекты могут храниться в антифризе достаточно долго, без признаков порчи и деструкции. Только зеленые части растений могут потерять при длительном хранении естественную пигментацию. Достигается полная прозрачность любых растительных и грабных объектов, устранение ригидности, удобная консистенция для изготовления срезов и помещения объекта в микропрепарат на предметное стекло. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ просветления грубых ботанических объектов для микроскопического изучения,включающий изготовление тонких срезов и помещение в просветляющий агент, отличающийся тем, что в качестве среды для хранения и регуляции консистенции объектов и просветляющего реагента во временном препарате используют антифриз при соотношении материала и консервирующей жидкости 11-12,а при изготовлении микропрепарата фрагмент или срез фиксированного объекта помещают на предметное стекло в каплю консерванта.

МПК / Метки

МПК: A01N 1/00

Метки: грубых, микроскопического, изучения, объектов, просветления, способ, ботанических

Код ссылки

<a href="http://kzpatents.com/3-ip30192-sposob-prosvetleniya-grubyh-botanicheskih-obektov-dlya-mikroskopicheskogo-izucheniya.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Способ просветления грубых ботанических объектов для микроскопического изучения</a>

Похожие патенты