Штамм Lactobacillus acidophilus AA-1, используемый для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебно-профилактического назначения

Скачать PDF файл.

Формула / Реферат

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма пробиотических бактерий Lactobacillus acidophilus АA-1 и может быть использован для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебно-профилактического назначения.
Изобретение - новый штамм Lactobacillus acidophilus АА-1 используемый для изготовления высокоантагонистических бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебно-профилактического назначения.
Данный штамм отвечает предъявленным требованиям. Уровень кислотообразующей активности штамма на среде MRS-бульон 223°Т, результаты зоны угнетения роста тест-штаммов: Staphylococcus aureus S60 -12±3, Proteus vulgaris 177 -19±3, Salmonella typhimurium 59-60-23±5, C.aerogenes C-13-19±2 показывают высокий уровень антагонистической активности штамма.

Текст

Смотреть все

(51) 12 1/20 (2010.01) 61 35/74 (2010.01) 23 9/12 (2010.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУА-1 и может быть использован для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебнопрофилактического назначения. Изобретение - новый штаммАА-1 используемый для изготовления высокоантагонистических бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебнопрофилактического назначения. Данный штамм отвечает предъявленным требованиям. Уровень кислотообразующей активности штамма на среде -бульон 223 Т,результаты зоны угнетения роста тест-штаммов 60 -123,177-193,59-60 - 235,. -13 - 192 показывают высокий уровень антагонистической активности штамма.(72) Кистаубаева Аида Сериковна Савицкая Ирина Станиславовна Жубанова Ажар Ахметовна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Казахский национальный университет им. аль-Фараби Министерства образования и науки Республики Казахстан-1, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ И ПРОИЗВОДСТВА ЖИДКОЙ МОЛОЧНОКИСЛОЙ ЗАКВАСКИ В КАЧЕСТВЕ ПРОДУКТА ПИТАНИЯ ЛЕЧЕБНОПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ(57) Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма пробиотических бактерий Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма пробиотических бактерийАА-1 и может быть использован для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебнопрофилактического назначения. Известен штамм . 317/402 Баланс-Наринэ используемый в качестве закваски для бактериального препарата для получения диетических и лечебных продуктов питания или для непосредственного употребления в пищу как лекарственное средство для лечения и профилактики дисбактериоза и его последствий(Патент на изобретение 2203946, опубликован 12.09.2001 г. Штамм бактерий . 317/402 Баланс-Наринэ используемый для приготовления противогастритного и противоязвенного кисломолочного продукта). Однако недостатком штамма . 317/402, является недостаточно высокая биологическая активность и технологичность. Задачей заявляемого изобретения является повышение антагонистической активности штаммаАА-1 в отношении тесткультур для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебнопрофилактического назначения. Техническим результатом заявленного изобретения является расширение арсенала штамма микроорганизмов для получения пробиотиков. Технический результат достигается штаммомАА-1 используемый для получения пробиотиков. Предлагаемый штамм получен путем многолетней селекции исходной культуры. ., выделенного из кишечника человека на питательной среде с возрастающими концентрациями антибиотиков и воздействия УФЛ (лампа БУВ-15, доза облучения 3900 эрг/мм 2). Отобран по антагонистической активности к возбудителям желудочно-кишечных заболеваний,кислотообразующей активности,адгезивной активности, скорости роста и т.д. Морфология Грамположительные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно,парами или в цепочку. Величина клеток 0,9-1,02,23,0 мкм, неподвижные. Метаболизм Микроаэрофильный микроорганизм с хемогетеротрофным метаболизмом. Культуральные признаки на поверхности агаризованной среды( , Индия) колонии мелкие, ровные, выпуклые, непрозрачные диаметром 2-3 мм, молочного цвета, -типа. На питательной среде -бульон образует равномерное помутнение среды и диффузионный рост. Для размножения штаммаАА-1 используемся среда КДС (казеинодрожжевая среда) при температуре инкубации 37,48 часов. Состав среды КДС г/л натрий хлористый 5,0 г/л,2 лактоза 10,0 г/л,-цистеин солянокислый 0,1 г/л,агар микробиологический 0,75 г/л. дрожжевой автолизат 650 мл/л,панкреотический гидролиза казеина с конечной концентрацией аминного азота 350 мл/л,режим стерилизации - 30 минут, при 112 С. Хранение в лиофильно-высушенном состоянии при температуре не выше 0 на защитной среде ЖСМС. Состав защитной среды ЖСМС (желатиносахарозо-молочная среда)Желатин 15-20 сахароза 5-10 молоко 50-70,стерилизация 30 минут, при 112 С. Физиологические и биохимические свойства 1 Продукт синтезируемый штаммом микроцин. АА-1 обладает антагонистической активностью в отношении тесткультур зона угнетения роста тест-штаммов 60 -123,177- 193,59-60 - 235,. -13 - 192. Штамм апатогенен, не обладает ферментативными активностями, ассоциированными с факторами патогенности и не оказывает токсического действия на организм лабораторных животных при различных способах введения и в максимальных дозах. Штамм АА-1 депонирован в ДТП Республиканская коллекция микроорганизмов (г. Астана) под номером В 0243 от 06.03.2009. Сущность изобретения подтверждается следующими конкретными примерами использования штаммаАА 1. Пример 1 . Результаты выращивания жидкой культуры штаммаАА-1 в условиях микробиологической лаборатории. Для получения посевного материала в ампулу с лиофилизированной культурой, содержащей 1 г сухого вещества, добавляют 1 мл стерильного раствора натрия хлорида 0,9. Посевной материал получают выращиванием микробной культуры штаммаАА-1 на поверхности агаризованной среды( ,Индия) методом истощающего штриха в термостате при 37 в течение 18-20 часов. Индивидуальные клоны штаммаАА-1,выросшие на поверхности агара, помещаются в бактериологические пробирки, содержащие 9 мл среды молока и выращивают в термостате при 37 в течение 15-18 часов. Выросшие в жидкой среде лактобациллы обуславливают сквашиванием молока. Из полученной культуры, готовят мазки,окрашенные по Граму. В мазках должны обнаруживаться Грамположительные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно,парами или в цепочку. Величина клеток 0,9-1,02,23,0 мкм, неподвижные. В препаратах не должно быть посторонней микрофлоры используют для получения стартовой биомассы. Посевной материал вносят во флаконы, содержащие 400-500 мл стерильного молока, в количестве 5 и выращивают при 37 в течение 15-18 часов. Начальная биомасса штамма АА-1 может быть использована для выращивания больших объемов биомассы изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебнопрофилактического назначения. Пример 2. Первичный скрининг по антибиотической активности выделенного штаммаАА-1 проводили методом перпендикулярных штрихов на плотной питательной среде в чашках Петри. На дно чашки Петри с плотной питательной средой МРС-5 петлей наносили полоской культуру штаммаАА-1. Посевы инкубировали при 37 в течение 72 часов в микроаэрофильных условиях. Затем к выросшей культуре лактобацилл подсевали культуры тест-штаммов,предварительно выращенные в МПБ в течение 18 часов. Посев тестштаммов производили петлей в направлении о т зоны роста штамма лактобактерий. Учет результатов проводили через 24 часа инкубирования при 37 по величине зоны отсутствия роста тесткультуры. В результате исследования зона угнетения роста тест-штаммов 60 -123,177 -193,59-60 - 235, . С 13 -192. Полученные результаты исследования антагонистической активности штаммаАА-1 свидетельствуют о том, что данный штамм характеризуется высоким уровнем,антагонизма к показанным тест-культурам (фиг. 2). Пример 3. Образование молочной кислоты определяли титриметрическим методом. Активность кислотообразования штаммов определяли титриметрическим методом. Суточные культуры лактобактерий центрифугировали и по стандарту мутности готовили суспензию, содержащую 1010 клеток в 1 мл. По 1 мл такой взвеси вносили в пробирки с 9 мл среды МРС и ОМ, культивировали при 37 в анаэробных условиях. Через 12-48 часов от начала культивирования вынимали по две пробирки, из которых отбирали по 10 мл культуральной жидкости добавили 20 мл дист. воды, 1-2 капли фенолфталеина и титровали ее 0,1 нпри постоянном взбалтывании до появления устойчивой слабо розовой окраски. Количество щелочи, пошедшей на титрование, соответствует количеству образуемой кислоты в 10 мл культуральной жидкости. Из полученных значений вычисляли среднюю величину. Окончательный результат выражали в градусах Тернера (Т). ТАхКх 20, пошедшее на титрование 10 мл исследуемого образца К - поправка к титру, определяемая при титровании 0,1 нН 0,1 н янтарной кислотой(0,009 г) Т- величина, выражающая количество 0,1 н щелочи, пошедшее на титрование 100 мл исследуемого образца. Титруемая кислотность которого колеблется в пределах 20-80 Т, считаются неактивными, а те у которых этот параметр свыше 120 Т высокоактивными. Полученные в результате проведенной работы данные свидетельствуют о хорошей кислотообразующей активности штаммаАА-1 (фиг. 3). ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Штамм-1,депонированный в ДГП Республиканская коллекция микроорганизмов РГП Национальный центр биотехнологии РК, под номером 0243,используемый для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебно-профилактического назначения.

МПК / Метки

МПК: A23C 9/12, C12N 1/20, A61K 35/74

Метки: lactobacillus, молочнокислой, acidophilus, лечебно-профилактического, жидкой, продукта, питания, бактериальных, изготовления, назначения, препаратов, штамм, закваски, производства, качестве, aa-1, используемый

Код ссылки

<a href="http://kzpatents.com/4-25085-shtamm-lactobacillus-acidophilus-aa-1-ispolzuemyjj-dlya-izgotovleniya-bakterialnyh-preparatov-i-proizvodstva-zhidkojj-molochnokislojj-zakvaski-v-kachestve-produkta-pitaniya-lechebn.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Штамм Lactobacillus acidophilus AA-1, используемый для изготовления бактериальных препаратов и производства жидкой молочнокислой закваски в качестве продукта питания лечебно-профилактического назначения</a>

Похожие патенты