Скачать PDF файл.

Формула / Реферат

(57) Использование: медицина, в частности, вирусология, а именно разработка новых противовирусных препаратов
Цель: применение в медицинской и ветеринарной практике препарата, на основе смеси растений Sapindus mucorossi и Polemonium caeruleum в соотношении 1:1 в качестве малотоксичного антивирусного средства растительного происхождения, эффективно иигибирующего размножение различных штаммов вируса гриппа.
Сущность изобретения: в качестве антивирусного средства растительного происхождения, обладающего вирусингибирующей и вирулицидной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа используют малотоксичную смесь лиофильно высушенных экстрактов, полученных из кожуры плодов растения Sapindus mucorossi и травы и листьев растения Polemonium caeruleum в соотношении 1:1. при содержании сапонинов в конечном продукте не менее 70% от сухой массы препарата.
Положительный эффект: преимущества предлагаемого композитного антивирусного средства перед существующими заключаются в большей эффективности действия по сравнению с коммерческими антивирусными препаратами против различных штаммов вируса гриппа, низкой токсичности, отсутствии резистентности у вирусов гриппа к новому антивирусному средству, доступности сырья для получения препарата. Предлагаемое композитное антивирусное средство позволяет расширить арсенал противогриппозных препаратов, и может быть использовано в качестве импортозамещающего противовирусного препарата.

Текст

Смотреть все

(51) 61 36/00 (2006.01) 61 31/12 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ происхождения,эффективно ингибирующего размножение различных штаммов вируса гриппа. Сущность изобретения в качестве антивирусного средства растительного происхождения, обладающего вирусингибирующей и вирулицидной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа используют малотоксичную смесь лиофильно высушенных экстрактов, полученных из кожуры плодов растения(Сапиндус мукоросси) и травы и листьев растения(Синюха голубая) в соотношении 11, при содержании сапонинов в конечном продукте не менее 70 от сухой массы препарата. Положительный эффект преимущества предлагаемого композитного антивирусного средства перед существующими заключаются в большей эффективности действия по сравнению с коммерческими антивирусными препаратами против различных штаммов вируса гриппа, низкой токсичности, отсутствии резистентности у вирусов гриппа к новому антивирусному средству,доступности сырья для получения препарата. Предлагаемое композитное антивирусное средство позволяет расширить арсенал противогриппозных препаратов, и может быть использовано в качестве импортозамещающего противовирусного препарата.(72) Турмагамбетова Айжан Сабиржановна Богоявленский Андрей Павлинович Березин Владимир Элеазарович Зайцева Ирина Алексеевна Соколова Надежда Сергеевна Алексюк Мадина Сапарбаевна(73) Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения Институт микробиологии и вирусологии Комитета науки Министерства образования и науки Республики Казахстан(56) Предварительный патент РК 9514,16.10.2000 г(54) КОМПОЗИТНОЕ АНТИВИРУСНОЕ СРЕДСТВО РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ВИРОСПАН(57) Использование медицина, в частности,вирусология,а именно разработка новых противовирусных препаратов. Цель применение в медицинской и ветеринарной практике препарата, на основе смеси растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11 в качестве малотоксичного антивирусного средства растительного Изобретение относится к области медицины, в частности вирусологии, а именно разработке новых противовирусных препаратов. Грипп и другие ОРЗ остаются самыми распространенными инфекциями из-за уникальной изменчивости возбудителей и глобального характера эпидемий. По данным ВОЗ заболевания,обусловленные вирусом гриппа, занимают первое место (35,8) среди причин смертности от вирусных инфекций. В качестве лечебных средств против вируса гриппа используются синтетические химиопрепараты и вещества растительного происхождения. Наиболее известным синтетическим лекарственным противогриппозным средством является гидрохлорид -метил-1 адамантилметиламина(ремантадин). Препарат обладает противовирусной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа А.(Лекарственные средства,применяемые в медицинской практике в СССР/ под ред. М.А.Клюева.-ММедицина.-1991.-512 с.). Однако,длительное использование ремантадина в медицинской практике, привело к появлению большого количества устойчивых к нему штаммов вируса гриппа, вследствие чего применение данного препарата стало малоэффективным. Другим известным противогриппозным препаратом является осельтамивир (коммерческое название тамифлю) - ингибитор нейраминидазной активности,обладающий противовирусной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа (Патент 5763483, фирмапо лицензии, .,353,,94404). Использование тамифлю в медицинской практике, привело к появлению большого количества устойчивых к нему штаммов вируса гриппа, вследствие чего применение данного препарата стало менее эффективным. Известен аналог изоникотиновой кислоты амизон,ингибитор гемагглютинирующей активности,обладающий противовирусным действием в отношении вируса гриппа (Патент 6752). Однако,данный препарат,имеет относительно низкую антивирусную активность для многих штаммов вируса гриппа. Известен сесквитерпеновый лактон гвайанового ряда, выделенный из экстрактов растения),обладающий антивирусной активностью по отношению к вирусу гриппа и вирусу болезни Ньюкасла (Бердин А.Г.,Адекенов С.М. Патент РК 9728). Однако данный препарат является токсичным,обладает относительно низкой активностью в отношении вируса гриппа и малодоступен для использования в нашей стране. Известно антивирусное средство растительного происхождения биологически активный флавоноидный агликон, выделенный из растения(Солянка холмовая). Данный препарат получают с помощью переэкстракции 2 надземной части растения серным эфиром и последующим разделением на колонке с силикагелем. Флавоноидный агликон обладает антивирусной активностью в отношении вируса гриппа А (Адекенов С.М., Кульмагамбетова Э.А.,Прибыткова Л Патент РК 9514). Вместе с тем,эффективность данного препарата является относительно невысокой,вирусингибирующее действие проявляется не ко всем исследованным штаммам вируса гриппа. Последний препарат растительного происхождения является наиболее близким аналогом по отношению к заявляемому антивирусному средству. Таким образом, известные антивирусные средства обладают рядом недостатков - они являются недостаточно эффективными,малодоступными или токсичными, что снижает возможность их применения в медицинской практике. Вследствие этого, имеется необходимость разработки новых более активных, малотоксичных препаратов, к которым не имеется устойчивости со стороны штаммов вируса гриппа. Целью изобретения является создание нового малотоксичного антивирусного средства растительного происхождения, эффективного в отношении различных штаммов вируса гриппа. Данная цель достигается путем смешивания лиофильно высушенных сапонинсодержащих экстрактов, полученных из растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая). Сущность изобретения заключается в получении спиртовых экстрактов из растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая), их лиофильном высушивании и смешивании в соотношении 11. Полученный растительный препарат способен эффективно подавлять размножение различных штаммов вируса гриппа. Сущность изобретения поясняется на следующих примерах. Пример 1 Для получения композитного антивирусного средства из растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) использовали кожуру плодов(Сапиндус мукоросси) и стебель и листья растения(Синюха голубая),отдельно размалывали на дробилке до получения частиц размером 2-4 мм. Содержание пыли не превышало 20. Измельчнное сырье двукратно, в течение четырх часов обрабатывали 5 кратным объмом этилового эфира уксусной кислоты при комнатной температуре для удаления липидов. Экстракцию растительного материала осуществляли 5 кратным объмом 80 этилового спирта в течение четырх часов,двукратно. Полученный экстракт отфильтровывали от растительного материала и высушивали при температуре не выше 56 С. Упаренные экстракты высушивали в вакуумвыпарном аппарате при постоянном перемешивании при температуре 50-60 С и разряжении 0,6 30933 0,7 кгс/см 2. Полученные высушенные экстракты смешивали в соотношении 11. Препарат представляет собой смесь экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11. Пример 2 Для качественного и количественного контроля подлинности и стандартизации композитного антивирусного средства на основе экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) использовали стандартные методы по определению содержания тритерпеновых сапонинов. Для анализа сапонинов, выделенных из растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) оптимальными условиями хроматографирования являлись элюирующая система бутанол - спирт этиловый - аммиак (725), детектирующий реагент 25 спиртовой раствор фосфорновольфрамовой кислоты с последующим прогреванием в течение 5 минут при температуре 105 С. На хроматограммах обнаруживаются 6 зон сапонинов сот 0,13 до 0,55. Для количественного определения суммы сапонинов, выделенных из растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая),использовали фармакопейную спектрофотометрическую методику, выраженный максимум поглощения наблюдался при длине волны 2822 нм (фиг.1). Наибольший выход сапонинов из сырья растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) обеспечивался при использовании в качестве экстрагента 80 спирта этилового. Содержание сапонинов в конечном препарате должно составлять не менее 70 от сухой массы. Пример 3 Для изучения токсичности композитного антивирусного средства, содержащего смесь экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили испытания на двух видах животных белых мышах обоего пола,массой 17-19 г, и крысах обоего пола, массой 250350 г. В исследованиях использовали здоровых животных, на которых ранее не проводили какиелибо испытания, содержащихся в соответствии с действующими правилами. Перед началом испытаний у животных определяли исходную массу. Испытание на белых мышах. Препарат вводили внутрибрюшинно 5-ти животным в дозе, равной 15,0 мг на кг веса и 50,0 мг на кг веса. Сухой препарат растворяли соответствующим растворителем(стерильный физиологический раствор) в объеме не более 0,5 мл. Испытание на крысах. Препарат вводили подкожно 2 животным в дозе, равной 15,0 мг на кг веса и 50,0 мг на кг веса. Сухой препарат растворяли соответствующим растворителем(стерильный физиологический раствор) в объеме не более 0,5 мл. Препараты вводили стерильным шприцем,погрешность измерения которого не должна превышать 4. Наблюдение за животными осуществляли ежедневно в течение 7 сут. Экспериментально установлено, что в дозе 15,0 мг на кг веса и 50,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11 не обладает токсическим действием при испытании на мышах и крысах(табл. 1). Пример 4 Изучение вирусингибирующей активности композитного антивирусного средства, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили на модели вируса гриппа А, штамм ///1/34(71). Вирус выращивали в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 24 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяли по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Подавление репродукции вируса определяли при одновременном инокулировании в куриные эмбрионы исследуемого антивирусного средства в разных дозах и вируса в количестве 100 ЭИД 50 с последующим определением титра гемагглютинации. Антивирусную активность испытуемого препарата сравнивали с антивирусной активностью коммерческих противовирусных препаратов ремантадин, тамифлю и амизон. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью критерия Стьюдента. Экспериментально установлено (табл. 2), что в дозе 4,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая), полностью подавляет репродукцию вируса гриппа//Росток/1/34. Вирусингибирующая активность разработанного антивирусного средства в отношении вируса гриппа///1/34 превышала вирусингибирующую активность коммерческих препаратов ремантадин и амизон и была сопоставима по активности с коммерческим противовирусным средством тамифлю. Пример 5 Изучение вирусингибирующей активности композитного антивирусного средства, на основе смеси растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили на модели вируса гриппа А, штамм А/Алматы/8/98 (32). Вирус выращивали в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяли по стандартной методике с 3 использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Подавление репродукции вируса определяли при одновременном инокулировании в куриные эмбрионы антивирусного средства в разных дозах и вируса в количестве 100 ЭИД 50 с последующим определением титра гемагглютинации. Антивирусную активность испытуемого препарата сравнивали с антивирусной активностью коммерческих противовирусных препаратов ремантадин, тамифлю и амизон. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью критерия Стьюдента. Показано (табл. 3), что в диапазоне доз от 0,032 до 4,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая), полностью подавляет репродукцию исследуемого вируса гриппа штамм А/Алматы/8/98. При этом вирусингибирующая активность разработанного средства в изученном диапазоне доз превышала вирусингибирующую активность коммерческих препаратов ремантадин, амизон и тамифлю. Пример 6 Изучение вирусингибирующей активности композитного антивирусного средства, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили на модели вируса гриппа А, штамм А/крачка/Южная Африка/1/61 (53). Вирус выращивали в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяли по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Подавление репродукции вируса определяли при одновременном инокулировании в куриные эмбрионы антивирусного средства в разных дозах и вируса в количестве 100 ЭИД 50 с последующим определением титра гемагглютинации. Антивирусную активность испытуемого препарата сравнивали с антивирусной активностью коммерческих противовирусных препаратов ремантадин, тамифлю и амизон. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью критерия Стьюдента. Показано (табл. 4), что в исследованном диапазоне доз от 0,032 до 4,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая),полностью подавляло репродукцию вируса гриппа А/крачка/Южная Африка/1/61. Вирусингибирующая активность разработанного средства в дозе 4,0 мг на кг веса превышала вирусингибирующую активность коммерческих препаратов амизон и тамифлю и была сопоставима с антивирусной активностью коммерческого препарата ремантадин. В дозе 0,8 мг 4 на кг веса разработанное средство значительно превышало вирусингибирующую активность коммерческих препаратов ремантадин, амизон и тамифлю. Пример 7 Изучение вирулицидной активности композитного антивирусного средства, на основе смеси растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили на модели вируса гриппа А, штамм ///1/34 (71). Вирус выращивали в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 24 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяли по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Вирулицидную активность разработанного средства определяли путем обработки вируссодержащего материала препаратом в дозе 4,0 мг на кг веса при 37 градусах Цельсия в течение 30 минут с последующим титрованием инфекционности обработанного материала. За реальное вирулицидное действие принимали разность между инфекционным титром вируса в пробе до и после экспозиции с исследуемым веществом. Вирулицидную активность испытуемого препарата сравнивали с вирулицидной активностью коммерческих противовирусных препаратов ремантадин, тамифлю и амизон. Инфекционный титр вирусов на куриных эмбрионах определяли путем десятикратных разведений в соответствии с методоми. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью критерия Стьюдента. Показано (табл. 5), что в дозе 4,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая), было способно снижать титр инфекционности вируса гриппа ///1/34 на 3,75 . Вирулицидная активность разработанного средства в отношении вируса гриппа///1/34 значительно превышала вирулицидную активность коммерческих препаратов ремантадин, амизон и тамифлю. Пример 8 Изучение вирулицидной активности композитного антивирусного средства, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили на модели вируса гриппа штамм А/Алматы/8/98(32). Вирус выращивали в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяли по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Вирулицидную активность разработанного средства определяли путем обработки вируссодержащего материала препаратом в дозе 4,0 мг на кг веса при 37 градусах Цельсия в течение 30 минут с последующим титрованием инфекционности обработанного материала. За реальное вирулицидное действие принимали разность между инфекционным титром вируса в пробе до и после экспозиции с исследуемым веществом. Вирулицидную активность испытуемого препарата сравнивали с вирулицидной активностью коммерческих противовирусных препаратов ремантадин, тамифлю и амизон. Инфекционный титр вирусов на куриных эмбрионах определяли путем десятикратных разведений в соответствии с методоми. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью критерия Стьюдента. Показано (табл. 6), что в дозе 4,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая), было способно снижать титр инфекционности вируса гриппа А/Алматы/8/98 на 2,5 . При этом, установлено, что вирулицидная активность разработанного средства превышала вирулицидную активность коммерческих препаратов ремантадин, амизон и тамифлю. Пример 9 Изучение вирулицидной активности композитного антивирусного средства, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая) в соотношении 11, проводили на модели вируса гриппа А, штамм А/крачка/Южная Африка/1/61 (53). Вирус выращивали в аллантоисной полости 9-10 дневных куриных эмбрионов в течение 36 часов при 37 градусах Цельсия. Гемагглютинирующую активность вирусов определяли по стандартной методике с использованием 1-ной взвеси куриных эритроцитов. Вирулицидную активность разработанного средства определяли путем обработки вируссодержащего материала препаратом в дозе 4,0 мг на кг веса при 37 градусах Цельсия в течение 30 минут с последующим титрованием инфекционности обработанного материала. За реальное вирулицидное действие принимали разность между инфекционным титром вируса в пробе до и после экспозиции с исследуемым веществом. Вирулицидную активность испытуемого препарата сравнивали с вирулицидной активностью коммерческих противовирусных препаратов ремантадин, тамифлю и амизон. Инфекционный титр вирусов на куриных эмбрионах определяли путем десятикратных разведений в соответствии с методоми. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью критерия Стьюдента. Показано (табл. 7), что в дозе 4,0 мг на кг веса композитное антивирусное средство, на основе смеси экстрактов растений(Синюха голубая), было способно снижать титр инфекционности вируса гриппа А/крачка/Южная Африка/1/61 на 4,25 и значительно превышало вирулицидную активность коммерческих препаратов ремантадин, амизон и тамифлю. Преимущество предлагаемого изобретения заключается в большей эффективности действия разработанного растительного антивирусного средства по сравнению с коммерческими антивирусными препаратами ремантадин, амизон и тамифлю против различных штаммов вируса гриппа,низкой токсичности,отсутствии резистентности у вирусов гриппа к новому антивирусному средству, доступности сырья для получения препарата. Предлагаемое антивирусное средство позволяет расширить арсенал противогриппозных препаратов. Таблица Изучение токсичности композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) Исследование Гибель животных Некроз или абсцесс Контроль - стерильный фосфатный буфер ( 7,2) Токсичность на крысах (подкожное введение) 15 50 0/2 0/2 0/2 0/2 ПримечаниеВ числителе дано количество погибших животных или имеющих некроз, в знаменателе - количество животных, получивших препарат. Летальность учитывалась в течение 7 суток после введения препаратов.Доза препарата в мг/кг животное. Таблица 2 Подавление репродукции вируса гриппа штамм ///1/34 (71) под действием композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) Подавление репродукции вирусаКомпозитное антивирусное средство на основе смеси экстрактов растений Тамифлю Амизон(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) 0,00,0 0,00,0 0,00,0 0,00,0 0,00,0 2,00,01 26,80,04 0,00,0 18,40,05 80,00,05 2,00,05 100,00,03 Таблица 3 Подавление репродукции вируса гриппа штамм А/Алматы/8/98 (32) под действием композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) Подавление репродукции вирусаКомпозитное антивирусное средство на основе смеси экстрактов растений Тамифлю Амизон(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) 0,00,0 0,00,0 98,80,01 0,00,0 0,00,0 100,00,0 46,30,05 0,00,0 100,00,0 68,80,05 5,40,02 100,00,0 Таблица 4 Подавление репродукции вируса гриппа штамм А/крачка/Южная Африка/1/61 (53) под действием композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) Подавление репродукции вирусаКомпозитное антивирусное средство на основе смеси экстрактов растений Тамифлю Амизон(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) 0,00,0 0,00,0 98,70,03 0,00,0 0,00,0 100,00,01 20,10,03 0,00,0 100,00,02 40,40,03 2,40,0 100,00,01 Таблица 5 Подавление инфекционного титра вируса гриппа штамм ///1/34 (71) под действием композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) Степень снижения титра инфекционности вируса, в десятичных логарифмах разведения Композитное антивирусное средство на основе смеси экстрактов растений Ремантадин Тамифлю Амизон(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) 0,50,05 0,50,03 0,250,03 3,750,01 Таблица 6 Подавление инфекционного титра вируса гриппа штамм А/Алматы/8/98 (32) под действием композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) Степень снижения титра инфекционности вируса, в десятичных логарифмах разведения Композитное антивирусное средство на основе смеси экстрактов растений Ремантадин Тамифлю Амизон(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) 0,20,05 0,00,0 0,00,0 2,50,05 Таблица 7 Подавление инфекционного титра вируса гриппа штамм А/крачка/Южная Африка/1/61 (53) под действием композитного антивирусного средства на основе смеси экстрактов растений Степень снижения титра инфекционности вируса, в десятичных логарифмах разведения Композитное антивирусное средство на основе смеси экстрактов растений Ремантадин Тамифлю Амизон(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) 0,50,03 0,50,04 0,250,03 4,250,03 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Композитное антивирусное средство растительного происхождения,обладающее вирусингибирующей и вирулицидной активностью в отношении различных штаммов вируса гриппа отличающееся тем, что в качестве антивирусного средства используют малотоксичную смесь лиофильно высушенных экстрактов растений(Сапиндус мукоросси) и(Синюха голубая) в соотношении 11, при содержании сапонинов в конечном продукте не менее 70 от сухой массы препарата.

МПК / Метки

МПК: A61K 36/00, A61P 31/12

Метки: композитное, растительного, средство, происхождения, вироспан, антивирусное

Код ссылки

<a href="http://kzpatents.com/7-ip30933-kompozitnoe-antivirusnoe-sredstvo-rastitelnogo-proishozhdeniya-virospan.html" rel="bookmark" title="База патентов Казахстана">Композитное антивирусное средство растительного происхождения &#8220;вироспан&#8221;</a>

Похожие патенты