Способ получения препарата против смешанной кишечной инфекции

(51) 12 15/74 (2006.01) 61 35/74 (2006.01) 12 1/20 (2006.01) МИНИСТЕРСТВО ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ смешанной кишечной инфекции у сельскохозяйственных животных и птиц,включающего микробную массу живых клеток антагонистически активных штаммов 3 и-15. Задача изобретения - расширение спектра действия и повышение антимикробной активности средства. Сущность изобретения. В состав препарата дополнительно введен штамм-53 н. Положительный эффект. Средство против смешанной кишечной инфекции у сельскохозяйственных животных и птиц с дополнительно введенным штаммом- 53 н превосходит прототип по спектру антимикробного действия и величине активности.(76) Саданов Аманкелди Курбанович Гаврилова Нина Николаевна Ратникова Ирина Александровна Бектурганов Нуралы Султанович(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПРОТИВ СМЕШАННОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ(57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе производства лечебно-профилактического средства против Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе производства лечебно-профилактического средства против смешанной кишечной инфекции у сельскохозяйственных животных и птиц. Известно лечебно-профилактическое средство,включающее микробную массу живых клеток антагонистически активных штаммов-15. Предлагаемое средство обладает способностью предотвращать гибель животных при заражении, оказывает иммуностимулирующее действие и ускоряет образование антител при вакцинации, а также отличается широким спектром антимикробного действия в отношении патогенных и условнопатогенных возбудителей кишечных заболеваний благодаря целенаправленному отбору в его состав штаммов молочнокислых бактерий - антагонистов к наиболее часто встречающимся возбудителям заболеваний,.,, В-5. В состав препарата входят пропионовокислые бактерии, которые стимулируют антагонитичесскую активность молочнокислых бактерий, снижают их зависимость от состава питательной среды, а также обогащают препарат витаминами группы В. Это обеспечивает высокую профилактическую и лечебную эффективность средства. Цель изобретения - расширение спектра действия и увеличение антимикробной активности средства. Поставленная цель достигается тем, что в состав препарата дополнительно введен штамм 53 н. Штамм 53 н выделен из желудочно-кишечного тракта здорового человека. 2 суточная культура представляет собой палочки размером 0,5-0,70,7-2,5 мкм с закругленными концами, одиночные, парные или в изогнутых цепочках. Растет на пивном сусле, обезжиренном и гидролизованном молоке,кукурузно-сахарной среде, среде . При росте на твердой питательной среде образует плоские гладкие и ризоидные колонии, не пигментированные. Факультативный анаэроб. Ферментирует целлобиозу, рибозу, галактозу,лактозу, маннозу, маннит, глюкозу, мелибиозу,сорбит, сахарозу. Не сбраживает арабинозу, рамнозу и ксилозу. Аргинин не использует. Гидролизует крахмал. Желатин не разжижает. Использует органические источники азота пептон, дрожжевой экстракт, мясной экстракт. Оптимальная температура роста 35-37 С. Растет при 15 С. При 45 С роста не наблюдается. 2 и индол не образует. Не патогенен. Обладает широким спектром антимикробной активности, в том числе к возбудителям колибактериоза, сальмонеллеза, пастереллеза, а также к микобактериям. Штамм депонирован в коллекции РГП Иинститут микробиологии и вирусологии КН МОН РК, коллекционный ИМиВ В-39. Обладает широким антимикробным спектром действия. Сущность изобретения поясняется следующим конкретным примером. Пример Ассоциации бактерий-53 н-315 выращивают отдельно при 37 в течение 24 часов на питательной средеследующего состава (г/л) дрожжевой экстракт - 5,0 мясной экстракт - 10,0 пептон - 10,0 глюкоза - 20,0 аммоний лимоннокислый 2,0 натрий уксуснокислый - 5,0 твин 80 - 1,0 КН 2 РО 4 -2,0 4 х 7 Н 2 - 0,2 4 х 4 Н 2 - 0,05 СоС 2 0,01 (4)24 - 3,0 (рН-6.2-6.6). Затем определяют антагонистическую активность в отношении взятых в опыт тест-культур следующим образом. Чашки Петри с ровным дном помещают на горизонтальную поверхность. На водяной бане расплавляют в колбах стерильную плотную питательную среду следующего состава (г/л) бульон Хоттингера - 30,0 пептон - 5,0 натрия хлорид - 5,0 глюкоза - 10,0 агар-агар - 20,0 вода питьевая для доведения объема среды до 1 л. После охлаждения до 45-50 С в агаризованную среду вносят взвесь тест-культуры из расчета 1,0 см 3 одномиллиардной взвеси на 100 см 3 среды. Содержимое колбы, перемешивают и разливают в чашки Петри по 10 см 3 в каждую. В застывшей среде бором вырезают лунки, обычно по шесть. В приготовленные лунки вносят по 0,1 см 3 односуточной культуры ассоциаций. Затем чашки выдерживают около 3 ч при комнатной температуре для диффузии раствора в агар, после чего помещают в термостат при температуре 37 С на 16-18 ч. Измеряют диаметр зон подавления роста тесткультур. Для каждого образца рассчитывают среднее арифметическое значение не менее чем из трех определений. Результаты представлены в таблице. Таблица Сравнительная характеристика антагонистической активности средства против смешанной кишечной инфекции различного способа приготовления Зоны подавления роста тест-организмов, мм Варианты опыта 1 212,00,33 16,00,6614,00,33 17,00,4915,00,98 18,00,88. 14,00,88 17,00,9910,00,66 11,00,5712,00,88 14,00,66471 16,00,88 180,8813,000,50 14,00,3316,00,45 18,000,5750 15,00,88 18,0 0,6610,00,33 15,00,3314,00,88 17,00,88-9 15,00,88 17,00,50. 16,00,88 18,00,570 14,00,6612,00,88 16,00,88-5 15,00,88 30,00,570 22,00.88 Примечание 1-средство, состоящее из штаммов . -2 .В-3 Р. -15 2 средство, дополнительно содержащее штамм . -53 н. Тест-организмы Как видно, из представленной таблицы,ассоциация, в которую дополнительно введен штамм 53 н, обладает более широким спектром действия и более высокой антимикробной активностью. Так, у данной ассоциации, в отличие от ассоциации без штамма 53 н, выявлена антагонистическая активность в отношенииии отмечено повышение антагонистической активности практически в отношении всех исследованных тесткультур, в особенности кВ-5 и. Таким образом, средство против смешанной кишечной инфекции со штаммом 53 н, введенным дополнительно в состав ассоциации, превосходит прототип по спектру антимикробного действия и величине активности. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения препарата против смешанной кишечной инфекции у сельскохозяйственных животных и птиц, включающий микробную массу живых клеток антагонистически активных штаммов-2,3 и-15, отличающийся тем,что в его состав дополнительно вводят штамм-53 н.