Способ получения замещенных андроста-1, 4-диен-3. 17-дионов

Нзддпетение относится к способу получения новых замещенных андрцстдГде 1 - водород или С,-С, алкил, Предлагаемые соединения проявляют сильное ингибирующее действие на аронатаэу в лабораторных условиях и обладают исключительно высокой эффективностью действия в пивом оргаиизне благодаря своей более высокой метаболической стабильности по сравнению с известными соединениямнанач. логичной структурно .П р Н н е р 1. 0,50 г 6 нетилен-. андроста-4-ан-3,17-диона н 0,5 г днхпорцианобензонинона (ДДХ) подвергают дефлегмацнн в 20 мл безводного дноксана в течение примерно 15-Ч, Для того чтобы удалить ДДК суспензиюфНЛЬТПУЮТЧЕрЕЗ ОКИСЬ 8 ЛЮННННПд пОСле выпаривания растворителя остатокрастворяют в этилацетата, органичес кий слой промывают водой, сушат надудаляют под вакуумом. неочищенный продукт подвергают хроматографии на СНЛНКЗГВЛЕ, ИСПОЛЬЗУЙ СМЕСЬ ГЕКСЗН этил ацетат 402 с тем, чтобы получить в результате 0,25 г чистого 6-метнлеиандроста-1 д-Диен-3,17-пиона,температура т.пл. 188-191 С, А макс. 247 д Е 13,750).В СООТВЕТСТВИИ С ППНСЗНПОЙ ПРОЦЕ дурой были получеиы.следУЮЩне соединения.П Р и м е р 2. Спесь 6-нетнлеиандроста 4-ен 3,7-дивна (0,50 г),двуокиси селена 10,50 г) и третбУтипового спирта (200 мл) нагревают до температуры дефлетнации в атмосфере азота В течение примерно 30 ч. Охлажденный раствор фильтруют, а затеи внаривают до сухого состояния при пониженном давлении, Остаток пе реносят в этил ацетат (100 мл), об рабатывают древесным углем н промывают последовательно водой, раствором сульфида аммония, холодным 172 раствором гидрата аммония, холодной разбавленной-хлористоводородной кисЛОТОН. Водой, Сушат с сульфатом натрнн и.наконец выпаривают до сухого состояния. неочищенный продукт подвергают хроматографии в соответствии с-описанием, приведенным в примере 1,в результата чего получают 0,20 г чистого 6 метнленаидроста-1,ддненСЛЕДУЯ той жВнроцедуре полУчалн следующие соединения.П р и м е р З. Раствор диметилт лития меди получают в атмосфере азота при помощи добавления 1,6 М раст вора В простом эфире нетнл лития вшлам иоднда одновалентной меди н безводном простом эфире при пс. Раствор перемешивают при НС в течедаопплвют 5 андрост 1 енн 3,1 лноп в безводном тетрагидрофуране и лере мешнпают еще н теченне.30 мин. Смесь слнппют.п насыщенный полный раствор хлорида аммонит. зятем добавляют Псизпц и попуценнут в результате смесь быстро фильтруют черезриатомопут землю. Органический слой промывают водным раствором хлорида аммочнл, водой, сушат над сульфатом магния и выпаривают до сухого состолнип. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, используя смесь гексанэтнл ацетат 10-202, в результате чего получают 1 рметил 5 анд роста-317 дионВ раствор 1 риетил 5 Ыдондростат 3,17 дноиа (3,025 г 10 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (100 мл) но каплям при 2025 С при энергичном нсремешинании добавляют раствор брот на (1,60 г, 10 нмоль в ледяной уксуспой кислоте 30 мл), содержащей пилу каплю 472 раствора Нвт. Бром расходуется в течение 20 мин.Полученный раствор сливают в поду и полученный в результате освдок собирают, тщательно промывают содой и сушат под вакуумом, в результате чего получают 3.82 г (1002) неочищенного дбром 1 рнетил 5 Ычандроста-3,днона.Раствор неочищенного соединения брома, полученного в соответсвни с описанием, в диметнлфорнамиде(100 мл) перемешивают с высушенным клоридогл лития (7 г) при 113045008. После охлаждения раствор сливают в воду и полученный в результате маслиннстый продукт окстрагируют с ис ппльзованпем простого эфира. Орга гнческнй слой промывают 102 ным раствором хлорпстоводородной кислоты н полой, сушат, а затем-выпаривают под вакуумом. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, испольоуп смесь гексан-этил ацетат 10-301,в результате чего получают 2,6 гСмесь ацетата натрия (1 г) абсолютного хлороформа (30 мл). Форм 1237П 2 д ноль), фосфорнл хлорида 13,8 мл,0,04 моль) н рчметнл-андрост-ен 317 дНонл (0 Н 11 г, 2,7 моль) перемешивают при температуре дофпег нации в течение примерно 7 ч, т.е. по тек пор, пока не исчезнет исходный материал. Суспензии дают возможность охладиться и при энергичном перемешивании по сыщеиный раствор карбоната натриядо тех пор, пока рН водного слои не станет щелочным (примерно 1 Ч). Оргаводой и сушат при помощи сульфата натрия После концентрации при пониженном давлении маслянистый остаток подвергают хроматографии на силикат геле, используя смесь гексантэтнп ацетат п качестве элюента. Таким образом получают чистый 1 ртметнл 6 мстнленандростшен 3,17 днон с 60 выходом 10,195 Р).П р и м е р 6, Раствор андрост днед-3,17-диона в третбутаноле нагревают но кипения Н В кипящий раствор добавляют треттбутилат калии в третнпутаноле. Затеи медленно добавляют метил хлорид в третнбутаноле. Раствор охлаждают, подкисляют концентрированной клорнстоводородной кислотой и разбавляют водой. Избыток третбутанола удаляют подваиууиом И водный слой экстрагируют этил ацетатом. Соединенные экстракты промывают полой, сушат над сульфатом магнии и выпаривают под вакуумом. остаток подвергают хроматографии на силикагеле и элюируют смесью гексан-этилацетат. Элюент выпаривают И остаток кристаллизуют из простого яфчра, в результате чего получают дметиландростсн 317 цион.В качестве альтернативы смесь андрцстден-317 днона тиофснола,н 02 ного водного раствора формальдегида, триэтиламина н этанола нагревают до температуры днфлсгмацни п течение примерно 48 ч. Пхлалленнън раствор сливают в водный раствор гидрата окиси натрия, в продукт изолируют прн помощи экстрагированияпрошивают водой нсушат над сульфатом магния, Полученный в результате остаток растирают с гексаном с тем,чтобы удалить любые побочные продукт ты конденсации, образовавшиеся из тнофелолаътформальдегпда.д-Фенилтпометиландростй-ен 3,7 Нднон, полученный таким образом, подвергают десульфуризацни при помощи растворения в ацетоне и добавления в суспензию Никеля Реиея н кипящем ацетоне. Смесь подвергают дефлегнацин в течение примерно 5 ч при перемешивании. Горячий раствор фильтруютИ НЕТЗПНЗЗТВР ПРОНЫВЕЮТ КНПЯЩНМ этанолом н водой. Соединенные фильтры ПОДБЕРГЮТ КДНЦЕЕНТРНПОВЗННЮ ПОД на куумом при этом продукт отделяют в виде твердой массы. В результате РВКПНСТЗТЪПНЗЗЦНН НЭ СМЕСИ ЗЦЕТОН гексаи получают д-нетилеидрост 4 ен 3,17 днон.Смесь ацетата натрия (г) абсолютного хлороформа (З 0 ил) днэтил ацеталь формальдегида (30 мл, 0,24 моль), фосфорнл хлорида 38 чп,0,0 д моль) и дметиландростй-ен 3,17 днона (081 г 2,7 ммоль подвергают дефлегмации в течение примерно 7 ч, т.е. до тоцо момента, пока не прореагируе 1 веси исходный матернал. Суспензии давали возможность окладитьсн н при энергичном перемешивании по каплям добавляют насыщеннът раствор карбоната натрия до тех пор,пока рн водного слоя не станет щелочным (примерно 1 ч). Органический спой отделяют, нейтрализуют водой , и сушат над сульфатом натрия. В результате концентрирования при понн пенном давлении получают масллнисты остаток, который подвергают хроматографии на силикагеле,-используя смесь ГЕКСППЭТНЛ ЭЦЕТЕТВ КЗЧЕСТВЕ ЗПЮВПТЗТаким образом получают чистой 4 метпп 6 метиленандросттд-ент 317Перемешивают Б-нетилепадроста-1,4 диен-317-днон лактозу н половину количества кукурузного крахмала, затем смесь просеивают через сито с размером отверстий 0,5 нм. КУКУРУЗНЫЙ Крахмал (10 г) суслепдпруют в теплую воду (90 ил) н полученную в результате пасту используют для гранулпрованни порошка. Грапулнт сушат,просеивают через сито с размером от верстпй 1,4 Ън, затем добавляют остаточное количество крахмала, тальк н стеарат магния, все это тщательно Перемешивают н прессуют в таблетки.П Р Н М 8 В 6. Капсулы, каждая из которых содержит дозу 0,200 г н 20 мг активного материала, получают следующим образом.Эту композицию помещают в желатиНОВЫЕ КЗПСУПН, СОСТОНЩНЕ НЭ ДВУХ половин, каждая капсула содержит дозу в 020 П г.Ингибирование-ароматааы при лоно щи предлагаемых соединений (испытывалось как п уйгго (ароматааа плацентычелонека) так н п чйуоВ качестве примера активность 6-метнлелаидроста 16 дненЗ,т 7 тдпона(внутренний код Р СЕ 24304) н 1 метнл 6 нетиленаидростадпнен 3,17 диона (внутренний код Р СЕ 2502) сравнивали с активностью хорошо известных ингибиторов аромнтаэы ок снандрост-ден 317 диона (4 ОНА) дЧ тестололактоиа н анцростат 14 диен-3,17-дивна.6 Нетнленандрост-Д-сн 3,7 днона был предложен в качестве эффективного промежуточного соединения ПРИ получении ценного с терапевтической точки зрения Ыметилового стеронд наго гормона однако какойлпбо терапевтнческой ценности самого соедп пения не было отмечено.А Ингибирование аромптаэы н ла боратррньш условиях 1 п чгпм1237 5 ферментную систему изолировали измпкнпсопдлъной фракции ткани человеческой ппппепты п соотиетстппн со стандартным приемом. Нсполъзппппп тпплнтччепкпй метод Тпнпсона н Синтепн г том, чтобы определить скорость драматизации, н соответствии с которьтгч определяют птпстзобождетъне 31510 из й(1 р, 2 р 3 Н) анппостен 317 пиона. Все стадии ппкубаннн осущест плллн п поляной бане при пстрлхнвапии17 С на но 3 духев буфере 10 мы фосфата калия, рН 7,5, который содержал поп ъпкс 1 1 мы ЭЛК н 1 мн литпот трС-ГттгщпаЭксперименты проводили в 1 мл обгона инкубации, содержащем 50 НМ дн(3 Н) яндростенднона различные концептрдцдп ингибиторов, 100 мн М АЛРН Н 0,05 пг мпкросомальных протеинов. Черпч 15 мин инкубации реакцию прегрпшнлн при помощи добавления хлоро Фпгпп (5 пл). После центрифугирования по скоростью 1500 3 в течение 5 ьшн отдепънып порцпп (П,5 мл) извлекали из полной фазы с цепью определения концентрации образовавшейся 3 Н 2 П.-Концентрацию каждого соединения,необходимую для уменьшения ингибинуопой прпнатазы на 502 (ИК 5) опроцплппн рм помощи построения графика п пгппдпнптях ингибирования В процентах н од концентрации пнгнбптот га. Относительную активность каждого поплпнспнп к д 0 ПА вычислили в соотпетстппп с соотношениемПчрпглын санок крысы дважды обрат батыпялн подкожным способом при помет шп 100 п.е. гппадотроппого гормона гынппоткп беременных лошадей (ГСБЛ)г нпторпрлом н Й дня с тем, чтобы споппчпгь лктппиосчь аропатазы пичНнппп п гпптпетстпнн с процедурой,гпчслннпй д.Н.Г.Продн п др., Ьегоа-ця.Чинна 3 дин погпе второй обработки ппн нпмптч ГСНЛ группам по 6 животных н каждой цдпалп стонатическпи спосот Поп гпстппритепь (0,5 д нетосел) НЛН ппгпдптпр п концентрации 30 мг/кг. шппптпых усыплплп спустя Ей ч, инк росочч нзплекплп на ппчпикоп н их актнпппнть ароматлзы ппрелЛллп с нспользоплнпен приема, анапптпчнпгп тому. чгп бью опнсдн п А.Инкубацию ппущпгтппплп п точение 30 мннв мл объема инкубации, соч держащеы 0,1 мг Нпнросшмальннч протеинон 1 П 0 НП 43 П 3 анцростондпппп н 100 мн Ы АДРН. Ингибирование в процентах активности контролируемой ароматном рассчптыпплн па осноне полученных данных согласно таблице, Новые соединения под полон Р СЕ 2 й 30 д н УСЕ 25027 являются очень снльпйнп ингибиторами оромлтазы.В опальных испытапнпк 1 п ч 1 ип новые соединения были очень эффек тнннъшп что явлнпосъ следствием его уникальной стойкости отногнтпльпо апатнчепкпго обмер помести В Тч время, как соединение дОНА окапыва лось неэффективным.Острая токсичность СЛПЗВЗ пропили гаенык соединений, при применении к мышам, определенная п результате разового пгпмепенпл возрастающих доз Н намеренная на тельной Цепь ппсп ле прннепепнп, оказалось пренебреппт но малой. Нппрпчер значение ЛЛ д для прсдпаглемыч соединений Г СЕ 2 д 30 д н Г СЕ 23027 пьмг, чем 800 мг/кг при оральном примененииГф о р м у п а п 3 о 6 р е т е н 1. Способ нплучепнп замещенных андррстпм 1 дшпиенч 3,17 щлионоп обшпйпе К, т водород пли С,-Сдалкпл,о т л И ч д т щ и й с п тем, что осуществляют дэгилрогепняяцню соедп пения общей формулы 2где Н, имеет указанные значения,С ПОМПЕЬЮ ПГЕТГГП ДВГТ-ТДЦРПГТЧРЧНЦГН 5 органпоеском растпппнтвле при тент перятуре кнпеннп С обратным холоп